ОБЩИЙ БЕЛОК АГАТ

Инструкция для печати (в формате pdf)

Регистрационные удостоверения (Россия, Казахстан)

Набор предназначен для количественного определения содержания общего белка в сыворотке или плазме крови в клинико-диагностических и биохимических лабораториях. 

Набор рассчитан на 400 определений (арт. 13038) или на 200 определений (арт. 19088) при расходе 5,0 мл рабочего раствора биуретового реагента на один анализ.

Ионы меди в щелочной среде взаимодействуют с пептидными связями белков сыворотки крови с образованием комплекса красного цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации общего белка и измеряется фотометрически  при длине волны 540 (500–560) нм.

1. Биуретовый реагент, концентрат (медь сернокислая – 120 ммоль/л, калий йодистый – 300 ммоль/л, калий-натрий виннокислый – 320 ммоль/л, натрия гидроокись – 3 моль/л), 100 мл (50 мл для набора ОБЩИЙ БЕЛОК АГАТ арт. 19088) – 1 флакон.

2. Калибровочный раствор общего белка (раствор бычьего сывороточного альбумина с концентрацией 60 г/л с добавлением хлористого натрия 9 г/л и азида натрия 1 г/л), 2 мл – 2 флакона (1 флакон для набора ОБЩИЙ БЕЛОК АГАТ арт. 19088).

Линейная область определения концентрации общего белка – в диапазоне от 20 до 120 г/л, отклонение от линейности – не более 3%.

Чувствительность определения – не более 10 г/л.

Воспроизводимость: коэффициент вариации не более 3%.

Нормальные величины концентрации общего белка в сыворотке (плазме) крови составляют:

– у взрослого человека 65–85 г/л;

– у новорожденных до 1 месяца 44–76 г/л;

– у детей до 1 года 51–73 г/л;

– у детей старше 1 года 60–80 г/л.

Качество набора можно оценивать по контрольным сывороткам, аттестованным данным методом.

Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин у обследуемого контингента.

При работе с данным набором необходимо соблюдать правила техники безопасности, рекомендуемые при работе с кровью в соответствии с «Инструкцией по мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний при работе в клинико-диагностических лабораториях лечебных и профилактических учреждений», утвержденной Минздравом СССР от 17.01.91 г., и «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР». 

При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять или передавать ВИЧ, вирус гепатита  или любой другой возбудитель вирусной инфекции.

Биуретовый реактив содержит щелочь, едкое вещество. В случае попадания раствора на кожу и слизистые необходимо сразу же промыть пораженное место большим количеством проточной воды. Пипетирование per os категорически запрещается. При попадании внутрь следует немедленно выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.

Другие компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.

– Спектрофотометр, длина волны 540 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 500–560 нм (зеленый светофильтр), кювета с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм;

– пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,10 и 5,0 мл;

– колба мерная вместимостью 2,0 л;

– пробирки вместимостью 5–10 мл;

– секундомер;

– вода дистиллированная;

– перчатки резиновые или пластиковые.

Негемолизированная сыворотка или плазма крови. 

Рабочий раствор биуретового реагента. Концентрат биуретового реагента развести дистиллированной водой в соотношении 1:19 (содержимое флакона – на 2 л раствора).

Калибровочный раствор общего белка готов к применению. 

В пробирки внести реактивы по следующей схеме:

 

Примечание: При использовании кювет другого объема расход реактивов может быть пропорционально изменен с сохранением соотношения объема образца к объему рабочего раствора 1:50.

Содержимое пробирок тщательно перемешать, избегая образования пены,  инкубировать при комнатной температуре (+18–25° С) в течение 30 минут, после чего измерить величину оптической плотности калибровочной и опытных проб против контрольной (холостой) пробы при длине волны 540 (500–560) нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 1 см. 

Окраска устойчива в течение 1 часа.

Концентрацию общего белка рассчитать по формуле:

 Eо

С = --------- x  60 ,

 Eк

где: С  – концентрация общего белка в опытной пробе, г/л;

Eо – оптическая плотность опытной пробы, ед.опт.плотн.;

Eк – оптическая плотность калибровочной пробы, ед.опт.плотн.;

60 – концентрация общего белка в калибровочном растворе, г/л.

Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2–8° С в течение всего срока годности. Допускается хранение  наборов  при температуре до +25° С не более 5 суток. 

Срок годности набора – 2 года.

Рабочий раствор биуретового реагента может храниться в темном месте в плотно укупоренной пластиковой посуде при комнатной температуре (+18–25° С) в течение 1 года.

Биуретовый реагент концентрат после вскрытия флакона может храниться в укупоренном виде при температуре +2–8° С в течение всего срока годности набора.

Калибровочный раствор общего белка после вскрытия флакона может храниться в укупоренном виде при температуре +2–8° С в течение 6 месяцев, но не более срока годности набора.

При концентрации общего белка выше, чем 120 г/л, исследуемый образец необходимо развести дистиллированной водой в соотношении 1:1, повторить анализ и полученный результат умножить на 2.

Инструкция составлена: к.б.н. И.В. Смирновым – зав. лабораторией ГНЦ РАМН, В.В. Майоровой – сотрудником ООО «Агат-Мед».